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T24-LUC-GFP-PURO细胞 YB-71227HC-LGP

1640,10%FBS;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养

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¥ 3500.00 /株
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T24-LUC-GFP-PURO细胞 

细胞详情

细胞名称

T24-LUC-GFP-Puro双标记的人膀胱移行细胞癌细胞

货    号

YB-71227HC-LGP

组织来源

81岁白人女性,膀胱

细胞形态

上皮样

生长方式

贴壁生长

描    述

人膀胱移行细胞癌细胞T24来源于一名81岁白人女性。该移行细胞癌患者的白细胞和血清对T24细胞及相关细胞株有细胞毒性。该细胞倍增时间为19小时,含癌基因ras (H-ras)。

构建信息

T24-LUC-GFP-Puro细胞为慢病毒感染T24细胞得到的稳定表达萤火虫荧光素酶和GFP的细胞系。

培养条件

1640,10%FBS;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养

换液频率

2-3天

传代周期

3-6天

传代比例

1:3-1:5

冻存液配方

70%基础培养基,20%FBS,10% DMSO

安全性

BSL-2

供应限制

仅供研究之用。


                                                                                                             细胞操作详细步骤

                           --悬浮细胞

1.细胞复苏

1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。

1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。

1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。

1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。

1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到5ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。

2.细胞传代

第一种方法:

2.1细胞密度达到2×106细胞/ml时,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.

第二种方法:

2.2细胞密度达到2×106细胞/ml时,将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶,并补充新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.

3.细胞冻存

将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度1-2×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。

4.注意事项

4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。

4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。

4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。

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