PC-3-LUC-GFP-PURO细胞
细胞详情 | |
细胞名称 | PC-3-LUC-GFP-Puro双标记的人前列腺癌细胞 |
货 号 | YB73316LG |
组织来源 | 62岁,白种人,男性,前列腺,源自转移部位:骨骼 |
细胞类型 | 上皮细胞 |
生长方式 | 贴壁生长 |
描 述 | PC-3源于一位62岁白人男性IV级前列腺腺癌患者的骨转移灶;有低水平的酸性磷酸酶活性和5-α-睾酮还原酶活性。 |
构建信息 | PC-3-LUC-GFP-Puro细胞为慢病毒感染PC-3细胞得到的稳定表达萤火虫荧光素酶和GFP的细胞系。 |
培养条件 | F12,10%FBS;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养 |
换液频率 | 2-3天 |
传代周期 | 4-6天 |
传代比例 | 1:3-1:4 |
冻存液配方 | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS |
安全性 | BSL-2 |
供应限制 | 仅供研究之用。 |
细胞操作详细步骤
--悬浮细胞
1.细胞复苏
1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。
1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到5ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
2.细胞传代
第一种方法:
2.1细胞密度达到2×106细胞/ml时,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
第二种方法:
2.2细胞密度达到2×106细胞/ml时,将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶,并补充新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
3.细胞冻存
将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度1-2×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。
本产品仅供科研使用.请勿用于医药,不能用于临床治疗诊断使用!